细胞生物学实验报告（通用6篇）
一、实验目的：
1、掌握显示细胞中过氧化物酶反应的原理和方法。2.了解细胞凋亡的生物学意义
3、掌握凋亡细胞的形态学检测方法
二、实验原理：
1、细胞内的过氧化物酶能把许多胺类氧化为有色化合物，用联苯胺处理标本，细胞内的过氧化物酶能把联苯胺氧化为蓝色的联苯胺蓝，进而变为棕色产物，因而可以根据颜色反应来判定过氧化物酶的有无或多少。中间产物蓝色联苯胺是不稳定的，无需酶的参加即可氧化为棕色化合物。
2、细胞凋亡是指细胞在生理或病理条件下，遵循自身的程序，自己结束其生命的过程。它是一个主动的、高度有序的，基因控制的，一系列酶参与的过程。
3、凋亡细胞形态学特征是:体积变小,细胞质浓缩;细胞核发生染色质凝聚和聚集于核膜周围(边缘化);细胞膜有小泡状形成;晚期细胞膜内陷形成大小不同的凋亡小体;根据细胞凋亡形态学特征进行显微观察是检测细胞凋亡的一种直观、可靠的方法。
三、实验步骤：
细胞中过氧化物酶的显示
1、在载片上滴一滴PBS缓冲液；
2、取骨髓细胞：用断颈法处死小鼠，立即剪取后肢，去除肌肉，剥出后肢股骨，剪开股骨一端，用牙签尖的一端插入剪开的小孔中，抠取少许骨髓细胞置滴有PBS的载片上；
3、涂片：用另一玻片将骨髓细胞沿一个方向涂布推开，室温晾干；
4、媒染：在涂片上滴0.5％硫酸铜液，以盖满涂片为宜，处理30秒-1分钟。5、倾去硫酸铜液，直接滴入联苯胺混合液反应6分钟（以盖满涂片为宜）6、清水冲洗，番红复染2min。
7、镜检：清水冲洗，室温晾干，先低倍镜下观察，后换高倍镜下观察（油镜100×）
细胞凋亡的形态学检测与观察吉姆萨染色:
1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞3、95%乙醇固定5min
4、PBS缓冲液洗2次
5、吉姆萨染色液染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液
7、普通光学显微镜下观察。吖啶橙染色:
1、取细胞爬片置于小培养皿中(有细胞面朝上)2、生理盐水轻轻漂洗细胞
3、甲醇：冰醋酸（3：1）固定5min4、PBS缓冲液洗2次每次1min
5、0.01%吖啶橙染色液在避光环境下染色5min6、蒸馏水轻轻洗去染液
6、选用蓝光激发滤片在荧光显微镜下观察。
四、结果与分析：
1、根据随机选择的几个视野的统计，该样品的细胞凋亡率=227/506×100=44.9
Hela细胞凋亡过程中核染色质的形态变化（吖啶橙染色）
五、思考题：
1、细胞凋亡的调控机制
细胞凋亡是一个受基因调控、众多细胞膜受体和胞浆蛋白参与的细胞主动自杀过程，其触发因素多种多样，包括细胞内诱导因子和抑制因子对细胞凋亡的调控。
2、细胞凋亡的特征
凋亡细胞形态学特征是:体积变小,细胞质浓缩;细胞核发生染色质凝聚和聚集于核膜周围(边缘化);细胞膜有小泡状形成;晚期细胞膜内陷形成大小不同的凋亡小体。
3、研究细胞凋亡的方法
定性的研究方法：常规琼脂糖凝胶电泳、脉冲场倒转琼脂糖凝胶电泳、形态学观察（普通光学显微镜、透射电镜、荧光显微镜）
定量或半定量的研究方法：各种流式细胞仪方法、原位末端标记法、ELISA定量琼脂糖凝胶电泳。
实验：
练习使用显微镜
目的要求：
1、练习使用显微镜，学会规范的操作方法。
2、能够独立操作显微镜。
3、能够将标本移动到视野中央，并看到清晰的图象。
材料用具：
显微镜，写有“上”字的玻片，动、植物玻片标本，擦镜纸，纱布。
方法步骤
1、右手握住镜臂，左手托住镜座。
2、把显微镜放在实验台距边缘7厘米左右处，略偏左。安装好目镜和物镜。
3、动转换器，使低倍物镜对准通光孔。
4、把一个较大的光圈对准通光孔。一只眼注视目镜内，另一只眼睁开。转动反光镜，使光线通过通光孔反射到镜筒内。通过目镜可以看到白亮的圆形视野。
5、把所要观察的玻片标本放在载物台上，用压片夹压住，标本要正对通光孔的中心。
6、转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓下降，直到物镜接近玻片标本为止此时眼睛一定要看着物镜）。
7、一只眼向目镜内看，同时逆时针方向转动粗准焦螺旋，使镜筒缓缓上升直到看清物象为止。再略微转动细准焦螺旋，使看到的'物象更加清晰。
8、练习将所观察的标本移到视野中央，先移动一下标本，物象朝相反的方向移动。说明了在目镜中看到的像是真实的像的倒像。
注意事项
实验完毕，把显微镜的外表擦拭干净。如需擦拭目镜和物镜，请用擦镜纸。转动转换器，把两个物镜偏到两旁，并将镜筒缓缓下降到最低处。最后把显微镜放进镜箱里，送回原处。
讨论
1、显微镜的使用步骤有哪些？
答：
1、取镜和安放
2、对光
3、观察（放片、调焦）
4、清洁与收镜
2、使用显微镜观察时，为什么在下降镜筒时眼睛要注视物镜？
答：物镜把载玻片压碎，也容易划伤物镜。
3、在显微镜下能看清写在不透明纸上的“上”字吗？
答：看不到，不透明的纸会阻挡光线从物镜进入光筒再从目镜射出，所以可能什么也看不见。
实验时间：20xx年9月15日
实验：
观察人体口腔上皮细胞
目的要求：
1、制作和观察人体口腔上皮细胞的临时装片
2、认识人体口腔上皮细胞的结构
3、熟练画细胞结构图
材料用具：
显微镜、吸水纸、载玻片、盖玻片、生理盐水、碘液、镊子、纱布、漱口杯、牙签
方法步骤
（一）制作人口腔上皮细胞的临时装片
1、用纱布擦净载玻片、盖玻片（很薄，应轻擦）
2、在载玻片中央滴一滴生理盐水（0.9%），说明：为什么用0.9%的生理盐水，观察洋葱表皮装片用清水，都是为了让细胞所处的环境和它们所生活的`环境相同，不至于胀破或变形，使细胞保持原状。
3、漱净口。目的：将口腔的饭粒清除，以保证所取的细胞纯度。
4、用牙签在口腔内壁轻划几下，将上面附有碎屑涂抹在生理盐水中，尽量涂均匀。
5、盖盖玻片。用镊子夹起盖玻片，使它的一侧先接触载玻片的水滴，然后慢慢放平（注意：避免产生气泡）。
6、染色。
①在盖玻片一侧滴加稀碘液，
②用吸水纸在盖玻片另一侧吸引，使染液
浸润标本的全部。
（二）用显微镜观察。
使用显微镜
①安放
②对光
③放置玻片标本，调节焦距，用眼观察，在视野中会看到被染成桔黄色的上皮细胞、
（三）绘图：
人体口腔上皮细胞模式图
（四）整理：清洁玻片，废物放在指定位置。
归纳讨论：人的口腔上皮细胞有哪些基本结构，植物细胞和动物细胞相同和不同之处。答：人的口腔上皮细胞的基本结构有细胞膜、细胞质和细胞核；植物细胞与动物细胞相比，细胞壁、叶绿体和液泡是植物细胞特有的。
实验时间：20xx年9月27日
一、实验目的'：
1、通过对原核和真核各种形态细胞的光学显微镜观察，了解细胞的形态及其显微结构；
2、学习显微测量的方法，对细胞的大小有一直观认识。
二、实验材料和仪器：
小白鼠肝细胞切片；鸡血红细胞；蚕豆叶片横切片；
普通光学显微镜；目镜测微尺；镜台测微尺；载玻片；盖玻片。
三、实验步骤：
(一)细胞形态观察
l、动物细胞的观察
（1）人肝细胞切片：在显微镜下仔细观察肝细胞的形态构造。
（2）鸡血细胞涂片的观察：观察血细胞的组成；红细胞、白细胞、血小板的形态特点。
2、植物细胞的观察
取蚕豆叶片横切片的观察：注意表皮细胞和叶肉细胞的基本结构。
（二）细胞的大小和测量
1、卸下目镜的上透镜，将目镜测微尺刻度向下装在目镜的焦平面上，再旋上目镜的上透镜。
2、将镜台测微尺刻度向上放在镜台上夹好，使测微尺分度位于视野中央。调焦至能看清镜台测微尺的分度。
3、小心移动镜台测微尺和转动目镜测微尺(如目镜测微尺分度模糊，可转动目镜上透镜进行调焦)，使两尺左边的一直线重合，然后由左向右找出两尺另一次重合的直线。
4、记录两条重合线间目镜测微尺和镜台测微尺的格数。按下式计算目镜测微尺每格等于多少μm：
镜台测微尺的格数
目镜测微尺每格的微米数=————————— × 10
目镜测微尺的格数
四、实验结果：
1、目镜校正：40倍显微镜目镜测微尺每格的微米数=17/70=0.24
2、细胞大小的测量：
五、作业与思考：
1、血细胞按含量高低，主要含有：红细胞，白细胞，血小板。
白细胞最大，红细胞次之，血小板最小。红细胞：主要的功能是运送氧。 白细胞：主要扮演了免疫的角色，当病菌侵入人体时，白细胞能穿过毛细血管壁，集中到病菌入侵部位，将病菌包围，吞噬。血小板：止血过程中起着重要作用。细胞形态见下图。
2、植物细胞一般比动物细胞大一些。形态图见下。
3、在不同放大倍数下，测定的细胞大小基本一致，但有一些偏差。放大倍数越大，在视野中同等实际距离下的两点视野距离更大，而更容易测量准确。
实验教师：
所在学校：x中学
目的要求：
1练习徒手切片
2认识叶片的结构
3画叶片的表皮细胞和保卫细胞
材料用具：
新鲜叶片（如菠菜、槐树、蚕豆的叶片），显微镜，双面刀片（两片、并在一起、一侧用胶布粘牢）、镊子、载玻片、盖玻片、叶片的永久切片、盛有清水的培养皿、滴管、吸水纸、碘液、纱布、毛笔、小木板。
方法步骤
方法与步骤要点
注意事项
（一）练习徒手切片，制作叶片横切片的临时切片
1将新鲜的叶片平放在小木板上。
2右手捏紧并排的两片刀片，沿着图中虚线的方向，迅速切割。
3把刀片夹缝中存在的切下的薄片放入盛有清水培养皿中。要多切几次（每切一次，刀片要蘸一下水）。
4用毛笔蘸出最薄的一片，制成临时切片。叶片下面要垫上小块木板，以防损坏桌面。刀片要捏紧，切割速度要快，注意安全。
为了便于观察，载玻片的水滴中可以同时放几片叶的横切片，选择切得最薄的一片用来观察。
（二）观察叶片的结构
1.用显微镜先观察叶片横切面的临时切片，再观察叶片的永久横切片。
2.观察时注意分清时的'表皮、叶肉和叶脉。
仔细观察上、下表皮细胞的区别
（三）观察叶片的下表皮
1.用镊子撕下一小块叶片的下表皮，制成临时装片。
2.用显微镜进行观察，下表皮细胞的形态是什么样子的，下表皮上有没有气孔？
撕取下表皮时，一定要薄，否则影响观察效果。
注意观察气孔的结构。
（四）画图
在下面空白处画出下表皮上一对保卫细胞及周围的几个表皮细胞，这一对保卫细胞要详细画，周围的细胞只需勾出轮廓。
画图时，要真实、实事求是。
讨论与交流
1.保卫细胞的结构特点对植物的蒸腾作用有什么意义？
2.从结构上看，叶片有哪些方面是适于接受阳光的？
一、实验目的
了解细胞膜[1]的渗透性及各类物质进入细胞的速度[2]
二、实验原理
1、在等渗溶液中，细胞对各种溶质的透过性不同。有的溶质可以进入，有的溶质不能渗入。
2、渗入的溶质能提高细胞的渗透压，促进水分子进入细胞，引起溶血现象[3]。
3、不同的溶质渗入到细胞内的速度不同，因此溶血时间也不同。
三、实验材料
新鲜血液（鸡血、猪血、牛血等）
四、实验器材
试管（1.5cmX18cm）、试管架、10ml移液管、1ml移液管、200ml烧杯（2个）、250ml容量瓶、移液枪、胶头滴管、菜刀、吸球、电子天平、显微镜、盖玻片、载玻片、秒表
五、实验药品及试剂
0.17MNaCl、0.17MNH4Cl、0.17MNH4Ac、0.17MNaNO3、0.12MNa2SO4、0.12M草酸铵、0.32M葡萄糖、0.32M甘油、0.32M乙醇、0.32M丙酮、肝素抗凝剂[4]
六、实验步骤
1、制备血液稀释液
（1）抗凝剂的制备：首先称取1克肝素钠粉末，然后加入0.17MNaCl溶液10ml（1∶10的比例），混合均匀，制成肝素抗凝剂。
（2）血液稀释液的制备：取新鲜血液，按比例（肝素抗凝剂:血液=1∶10）混合均匀，配制成经肝素抗凝的血液[5][6]。
（3）按比例（经肝素抗凝的血液∶0.17MNaCl溶液=1∶10）混合均匀，形成一种不透明的红色液体[7]。
2、低渗溶液（空白对照）的观察
取试管一只，加入10ml蒸馏水，然后再加入1ml稀释的血液。注意观察溶液颜色的变化。结果是溶液由不透明的.红色变为澄清。记录下这个过程所要的时间。
3、红血球的渗透性
按表一的配制，分别在下列十种等渗溶液中进行实验。轻轻摇动，注意有无颜色变化，是否有溶血现象发生，记下时间（自加入稀释血液到溶液逐渐由红色变为透明澄清，红血球全部溶血所需时间），填入表一的空格中。
4、显微观察
[1]何为细胞膜？[5]注意：这一步，动作要非常迅速，否则鸡血会凝固。或者先把抗凝剂加入到烧杯中，再加入新鲜的[2]鸡血，边加边震荡即可。为何不同物质进入细胞的速度不同？[6]为什么新鲜的鸡血会凝固？[3]何为溶血现象？[7]为什么这一步要使用0.17M的NaCl溶液？[4]你知道有哪些血液抗凝剂？
（1）血液红细胞的观察
滴一滴稀释的血液于载玻片上，盖上盖玻片。用光学显微镜观察细胞的种类、形状和颜色。
（2）细胞破碎的观察
在上一步的载玻片的一端滴加清水，在另一端吸水，并在显微镜下观察细胞的破裂。
七、实验结果与分析
1、比较和分析你所观察到的实验结果，并解释原因。
结果：
（1）在所提供的试剂中不溶血的有：
（2）在所提供的试剂中不完全溶血的有：
（3）在所提供的试剂中完全溶血的有：
结果分析与比较：结论：
2、绘制你所观察到的血液细胞图。
3、讨论溶血实验在研究中应用的可能性。